固相萃取中常見(jiàn)的問(wèn)題及解決方法

01

原因1：SPE柱沒(méi)有很好地被預(yù)處理

解決方法：反向柱：用甲醇，異丙醇或乙醇處理柱子，然后用稀釋樣品的溶劑處理柱子，注意不能讓SPE柱變干。

原因2：SPE柱的極性不合適

解決方法：選擇對(duì)目標(biāo)化合物有明顯選擇性的SPE柱。

原因3：目標(biāo)化合物對(duì)樣品溶液的親和力遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對(duì)SPE柱的親和力

解決方法：改變極性或樣品溶液的pH使目標(biāo)化合物在樣品溶液中的親和力降低。

原因4：當(dāng)大體積水樣品通過(guò)SPE柱時(shí)，反相柱填料失去柱子預(yù)處理留下的甲醇

解決方法：在樣品溶液中加入1%-2%的甲醇或異丙醇或乙腈。

02

原因1：SPE柱的極性不合適

解決方法：選擇其他低極性或者選擇性弱的SPE柱。

原因2：洗脫溶劑不夠強(qiáng)，無(wú)法將目標(biāo)物化合物從SPE柱上洗脫

解決方法：改變洗脫溶劑的pH以增加其對(duì)目標(biāo)化合物的親和力。

原因3：洗脫溶劑體積太小

解決方法：增加溶劑體積。

原因4：目標(biāo)化合物被不可逆地吸附在SPE載體上

解決方法：反相：選擇疏水性弱的載體。如果原來(lái)用的C18，則改為C8,C2,CN。

陽(yáng)離子交換：用羧酸取代苯磺酸。

陰離子交換：用伯胺、仲胺代替叔胺。

03

原因1：在添加樣品之前SPE柱已干燥

解決方法：重新進(jìn)行SPE預(yù)處理。

原因2：SPE柱超容量

解決方法：減少樣品量或選擇大容量柱。

原因3：樣品過(guò)柱流速太快

解決方法：降低流速。

原因4：洗脫液流速太快

解決方法：在使用外力之前讓洗脫液滲透過(guò)柱。兩次5ml洗脫可能比一次10ml，更有效。

原因5：目標(biāo)化合物在樣品中的溶解度太大，樣品過(guò)柱時(shí)與樣品同時(shí)通過(guò)柱子而沒(méi)有被保留

解決方法：通過(guò)改變樣品極性或pH而改變目標(biāo)化合物的溶解度。

原因6：SPE柱用極性溶劑處理而洗脫劑是不兼容的非極性溶劑

解決方法：在使用非極性溶劑之前對(duì)SPE柱進(jìn)行干燥。

原因7：洗滌雜質(zhì)用的溶劑太強(qiáng)，部分目標(biāo)化合物與雜質(zhì)同時(shí)被從SPE柱洗脫。目標(biāo)化合物在這一步損失的多少取決于洗滌溶劑的流速，SPE的特性以及洗滌溶劑的體積。

解決方法：降低洗滌溶劑的強(qiáng)度。

原因8：洗脫液體積太小

解決方法：增加洗脫液的體積。

04

原因：目標(biāo)物化合物洗脫之前SPE柱沒(méi)有很好地干燥

解決方法：用氮?dú)饣蚩諝飧稍颯PE柱：用20~100μL含60%-90%甲醇-水將SPE柱上的殘留水分除去。

05

原因1：干擾物與目標(biāo)化合物被同時(shí)洗脫

解決方法1：在洗脫目標(biāo)化合物之前選用中等極性的溶劑將干擾物洗滌出SPE柱。可將兩種或更多種的溶劑混合以達(dá)到不同的極性。

解決方法2：選用對(duì)目標(biāo)物化合物親和力更大而對(duì)干擾物親和力低的SPE柱。

原因2：干擾物來(lái)自SPE柱

解決方法1：用兩根不同極性的SPE柱以除去干擾物。如反相柱和離子交換柱或硅膠柱。

解決方法2：在柱子預(yù)處理之前用洗脫溶劑洗滌SPE柱。

06

原因1：樣品存在過(guò)多的顆粒

解決方法：對(duì)樣品進(jìn)行過(guò)濾或者離心。

原因2：樣品溶液粘度太大

解決方法：用溶劑對(duì)樣品進(jìn)行稀釋。

07

原因：目標(biāo)化合物不在液體溶液中

解決方法：用甲醇、異丙醇或乙醇對(duì)樣品進(jìn)行均漿處理。然后離心過(guò)濾，再用水將清液稀釋為含水量70%-90%的水溶液。

08

原因：目標(biāo)化合物不在液體溶液中

解決方法：用非極性溶劑（如正己烷、石油醚、氯仿等）均漿。