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021-50276769在介紹反相離子對試劑之前，我們先回憶一下離子對色譜法（Ion-pair chromatography，IPC），離子對色譜法可被看作是以分離離子樣品為目的的反相色譜法（Reversed-phase chromatography，RPC）的改良形式。IPC與RPC唯yi不同的條件是IPC在流動相中添加了離子對試劑，這些試劑能在平衡過程與酸性化合物的A-或者堿性化合物的BH+發(fā)生相互作用。
“ 關(guān)于離子對試劑 "
離子對試劑是由強(qiáng)親水離子形成，反作用于樣品分子的中性離子對。因此，可用于同時分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對色譜法是把離子對試劑加入到含水流動相中，被分析的組分離子在流動相中與離子對試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果。
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一般情況下，在建立HPLC分離方法的時候，我們推薦由RPC開始，接著添加離子對試劑（僅當(dāng)有需要時）。舉個例子，當(dāng)我們已知某個峰是對應(yīng)一個酸性物質(zhì)、堿性物質(zhì)或中性物質(zhì)時，我們便能準(zhǔn)確地預(yù)測出添加的IPC試劑對溶質(zhì)保留的影響。因此，當(dāng)改變RPC的其他條件仍不能達(dá)到合適的分離度時，我們可以通過使用IPC試劑不斷改變酸性溶質(zhì)和堿性溶質(zhì)的保留行為從而改善他們的分離效果。
那么，IPC在什么時候或者應(yīng)用于什么物質(zhì)的分離會是比較合適的分離方法呢？在樣品出現(xiàn)以下特點時我們就可以考慮使用離子對試劑：
（1）在反相色譜柱上不保留或保留弱；
（2）化合物帶有強(qiáng)離子官能團(tuán)，如羧基、銨基、氨基等；
（3）化合物在反相體系流動相中有足夠的溶解度。
使用離子色譜法可令樣品的保留行為產(chǎn)生類似于改變流動相的pH的變化，但是離子對色譜法能更好的控制酸性溶質(zhì)或堿性溶質(zhì)的保留行為，而且無須使用ji端的流動相pH（如，pH＜2.5或pH＞8.0）。
“常見的離子對試劑"
常見的離子對試劑主要包括如下幾類：
陰離子對試劑：四丁基氫氧化銨、四丁基溴化銨等堿性試劑，適用于結(jié)構(gòu)式中含磺酸基、羧基等的極性化合物。
陽離子對試劑：甲烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉等，適用于結(jié)構(gòu)式中含銨基、氨基等的極性化合物。
其他離子對試劑：高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。
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