蜂蜜中大環內酯類藥物殘留量測定

大環內酯類抗生素是利用放線桿菌或小單孢菌生產的具有大環內酯的抗生素的總稱，是由二個糖基與一個巨大內酯結合而成的，它對革蘭陽性菌、支原體、衣原體有較強的抑制能力，屬一種中譜抗生素，按其大環結構含碳的不同，可分為14元、15元和16元環大環內酯類抗生素。近年來，作為動物飼料添加劑的大環內酯類抗生素已成為世界范圍內需求量和銷售速度增長最快的抗生素之一，已占世界抗生素市場銷售總值的8.5%，此類抗生素在全球飼料中的使用量僅次于四環素類抗生素。

自1952年發現紅霉素（EM）以來，已連續有竹桃霉素（OM) 、螺旋霉素（SPM)、吉他霉素（KT)、羅紅霉素、麥迪霉素、交沙霉素（ JM )、克拉霉素及的衍生物問世，并出現動物專用品種如泰樂菌素（TS )、替米考星（TLM）等。屬十四碳大環的有紅霉素、竹桃霉素；屬十六碳大環的有泰樂菌素、吉他霉素和螺旋霉素，替米考星是泰樂菌素的半合成化合物，相比于其他大環內酯類抗生素有相似或更強的抗菌活性。

大環內酯類抗生素經口服后能很好地被吸收，廣泛分布于組織，特別是肝、肺、腎組織。細菌對此類抗生素易產生耐藥性。動物經過長期喂食后，抗生素及其代謝物在動物組織及器官內蓄積，可造成前庭和耳蝸神經的損害，導致眩暈和聽力減退，重者造成肝腎的嚴重損害。如不能很好地控制殘留，會對人類健康構成嚴重威脅。因此我國制定了紅霉素，螺旋霉素，替米考星，泰樂菌素等7種大環內酯類抗生素的最大殘留量。

Masakazu Horie等采用0.2%偏磷酸-甲醇（60/40，V/V）提取，然后通過OASIS HLB進行凈化：用甲醇水活化后，加入樣品，再用水淋洗，最后用甲醇洗脫，該方法在加標0.2μg/g時，樣品加標回收率為70.4%~93.2%。

GB/T 23408-2009蜂蜜中大環內酯類藥物殘留量測定 液相色譜-質譜/質譜法。

樣品溶液：稱取蜂蜜5.00g，于50mL離心管中，加入15mL 0.1mol/L 碳酸鈉緩沖溶液，渦旋混勻1min。 

BRP固相萃取柱（60mg，3mL），用3mL甲醇，5mL水活化；

提取液過柱，棄去；

用5mL水，5mL甲醇+水（2+8）淋洗，棄去，抽干；

5mL甲醇洗脫并收集。

洗脫液50 ℃氮吹至干，加入1mL甲醇+水（4+6），混勻，過0.22μm濾膜，上機。

結論：

使用月旭Welchrom^® BRP 60mg，3mL檢測蜂蜜中替米考星、螺旋霉素-I、竹桃霉素、紅霉素、羅紅霉素、泰樂菌素、交沙霉素回收率分別為86.5%、79.4%、87.2%、114.8%、91.5%、71.9%、71.7%，樣品回收率滿足要求。