S-X3凝膠色譜法的原理比較特殊類似于分子篩。
待分離組分在進(jìn)入S-X3凝膠色譜法后，會(huì)依據(jù)分子量的不同，進(jìn)入或者不進(jìn)入固定相凝膠的孔隙中，不能進(jìn)入凝膠孔隙的分子會(huì)很快隨流動(dòng)相洗脫，而能夠進(jìn)入凝膠孔隙的分子則需要更長時(shí)間的沖洗才能夠流出固定相，從而實(shí)現(xiàn)了根據(jù)分子量差異對各組分的分離。
S-X3凝膠色譜法的優(yōu)缺點(diǎn)
S-X3凝膠色譜法的優(yōu)點(diǎn)：
①一次實(shí)驗(yàn)所需時(shí)間可以預(yù)先知道，因?yàn)椴粫?huì)超過整個(gè)色譜柱中全部溶劑流出色譜柱所需時(shí)間；
②整個(gè)淋洗均用單一淋洗劑，不使用梯度淋洗；
③試樣在柱中稀釋少，因而容易檢測；
④只要試樣能溶解就能測定，減少了用于試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)條件的時(shí)間；
⑤組分的保留時(shí)間提供它們的分子尺寸信息。
S-X3凝膠色譜法的缺點(diǎn)：
①要得到分離效果，試樣間必須有分子尺寸的差別。分子尺寸相同的混合物（如異構(gòu)體的混合物）不易分開；
②色譜柱的分離度比其他類型的低；
③峰容量小,一組具有20000理論塔片的凝膠色譜柱，按峰容量＝1+0.2(理論塔片數(shù))[sb-2fz1] 來估計(jì),在擴(kuò)散系數(shù)相同時(shí),理論峰容量為 30，而其他類型液相色譜法中，這個(gè)值要大得多；
④可能有其他保留機(jī)理起作用，引起干擾，例如，填料表面殘留活性基團(tuán)引起對溶質(zhì)的吸附。
